BACTERIOLOGIA

CENTRO DE BACHILLERATO TECNOLÓGICO INDUSTRIAL Y DE SERVICIOS N° 103                                                                     

                                                           BACTERIOLÓGIA

DOCENTE: BIÓLOGA MARISOL MATA GUZMÁN

                                                                   MODULO II

IDENTIFICA ORGANISMOS CON BASE EN TÉCNICAS MICROBIOLÓGICAS PARA EL DIAGNOSTICO CLÍNICO.

                                                                    MODULO I

IDENTIFICA MICROORGANISMOS CON BASE EN TÉCNICAS BACTERIOLÓGICAS.

                                                  RESULTADO DE APRENDIZAJE:

AL FINALIZAR EL MODULO EL ESTUDIANTE SERA CAPAZ DE: 

1.- IDENTIFICAR MICROORGANISMOS PARA DIAGNÓSTICOS

2.-IDENTIFICAR MICROORGANISMOS EN BASE A TÉCNICAS BACTERIOLÓGICAS.

PROPOSITO DE LAS ECA'S

DESCRIBIR LAS CARACTERÍSTICAS MORFOLÓGICAS Y FISIOLOGÍA BACTERIANA, APLICAR LAS TÉCNICAS BACTERIOLÓGICAS PARA EL AISLAMIENTO E IDENTIFICACIÓN DE MUESTRAS BIOLÓGICAS DEL CUERPO HUMANO.

           MORFOLOGIA

CLASIFICACION Y NUTRICION

CONCEPTOS SUBSIDIARIOS

*IDENTIFICAR BACTERIAS CON BASE A TIPOS DE CULTIVO. UTILIZANDO TECNICAS MANUALES Y AUTOMATIZADAS.

*ESTRUCTURA BACTERIANA (ELEMENTOS OBLIGADOS Y FACULTATIVOS) TAMAÑO, MORFOLOGIA, NUTRICION  CULTIVOS BACTERIANOS

*TECNICAS DE DESCONTAMINACION, DESINFECCION Y ESTERILIZACION

*TECNICAS DE CULTIVO Y SIEMBRA

*TECNICAS DE TINCIONES DIFERENCIALES Y SELECTIVAS LABORATORIO DE BACTERIOLOGIA.

OBJETIVO GENERAL 

LA MICROBIOLOGIA ES LA CIENCIA QUE ESTUDIA LOS MICROORGANISMOS TANTO COMO AQUELLOS CAUSANTES DE ENFERMEDADES COMO LOS SAPROFITOS Y LOS BENEFICIOSOS, ENGLOBA EL ESTUDIO DE BACTERIAS, HONGOS, PARASITOS Y VIRUS.

EL LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA ES UN LUGAR CONVENIENTE HABILITADO DONDE CON LAS DEBIDAS PRECAUCIONES SE PUEDEN MANEJAR Y EXAMINAR MICROORGANISMOS. TODOS LOS MICROORGANISMOS QUE SE MANIPULEN DEBEN SER MANEJADOS CON PRECAUCION POR SU POTENCIAL PATOGENICIDAD.

            PRACTICA N° 1 "LIMPIEZA Y SECADO DEL MATERIAL DE CRISTALERIA"

OBJETIVO: EL ALUMNO UTILIZARA SUSTANCIAS QUIMICAS PARA ELIMINAR CUALQUIER MICROORGANISMO IMPREGNADO EN EL MATERIAL DE LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA.

LA CONDICIÓN FUNDAMENTAL QUE DEBEN DE OBSERVAR LOS MATERIALES PREVIOS A LA DESINFECCIÓN Y A LA ESTERILIZACIÓN ES LA LIMPIEZA QUE CONSECUENTEMENTE PRODUCIRÁ LA ELIMINACIÓN DE LA SUCIEDAD Y LA DISMINUCIÓN DE LA CARGA MICROBIANA INICIAL,

EL LAVADO SE HARÁ UTILIZANDO AGENTES NEUTROS DE LIMPIEZA, CEPILLO DE CERDAS BLANDAS, AGUA A TEMPERATURA ENTRE 40-50°C 

   PRACTICA N°2 "EMPACADO DEL MATERIAL Y ESTERILIZACIÓN POR CALOR SECO"

OBJETIVO: EL ALUMNO APRENDERÁ EL PROCEDIMIENTO PARA EMPACAR DIVERSOS MATERIALES DE USO EN MICROBIOLOGIA ASÍ COMO EL PROCEDIMIENTO DE ESTERILIZACIÓN POR CALOR SECO.

EL MATERIAL A ESTERILIZAR SE DEBERA DE EMPACAR CORRECTAMENTE CON PAPEL DE ESTRAZA. LAS VARIEDADES DEPENDEN DE UNA SERIE DE CARACTERISTICAS FISICAS QUE HACEN QUE EL PAPEL SE PUEDA ADAPTAR A DIFERENTES USOS COMO: IMPEDIR EL INGRESO DE MICROORGANISMOS AL INTERIOR, SELLAR EN FORMA COMPLETA PARA EVITAR LA CONTAMINACIÓN, SOPORTAR LA ATRACCIÓN Y MANIPULACIÓN HABITUAL SIN SUFRIR DETERIORO Y HACER PERMEABLE AL METODO DE ESTERILIZACIÓN SELECCIONADO.

PRACTICA N°3 "ESTERILIZACION POR CALOR HUMEDO"

OBJETIVO: EL ALUMNO CONOCERA Y APLICARA EL PROCEDIMIENTO DE ESTERILIZACION POR CALOR HUMEDO.

EL CALOR HUMEDO MATA A LOS MICROORGANISMOS COAGULANDO SUS PROTEINAS.

EL APARATO A ESTERILIZAR QUE UTILIZA VAPOR DE AGUA A PRESION REGULADA SE DENOMINA AUTOCLAVE.GENERALMENTE EL AUTOCLAVE FUNCIONA A UNA PRESION DE 15LIBRAS/PULGADA CUADRADA A 121°C. EL TIEMPO DE FUNCIONAMIENTO PARA LOGRAR LA ESTERILIDAD DEPENDE DE LA NATURALEZA DEL MATERIAL QUE SE VA A ESTERILIZAR. UNA TEMPERATURA DE 100°C ES LA SUFICIENTE PARA MATAR A TODAS LAS FORMAS BACTERIANAS EN 2 O 3 MINUTOS.

ESTE METODO ES ADECUADO PARA ESTERILIZAR APARATOS QUE TIENEN HULE, JERINGAS QUE CONTIENEN METAL. EL AUTOCLAVE SE PUEDE SUSTITUIR POR LA OLLA DE PRESION.

PRACTICA N° 4 "PREPARACION DE MEDIOS DE CULTIVO"

OBJETIVO: ADIESTRAR AL ALUMNO EN LA PREPARACION DE DIFERENTES MEDIOS DE CULTIVO.

EL MATERIAL ALIMENTICIO EN EL QUE CRECEN LOS MICROORGANISMOS ES EL MEDIO DE CUULTIVO Y EL CRECIMIENTO DE LOS MICROORGANISMOS ES EL CULTIVO.

UN MEDIO DE CULTIVO DEBE DE CONTENER LOS NUTRIENTES Y FACTORES DE CRECIMIENTO NECESARIOS Y DEBE DE ESTAR EXENTO DE TODO MICROORGANISMO CONTAMINANTE. LA MAYORIA DE DE LAS BACTERIAS PATOGENAS REQUIEREN NUTRIENTES COMPLEJOS SIMILARES EN COMPOSICION A  LOS LIQUIDOS ORGANICOS DEL CUERPO HUMANO POR ESO LA BASE DE MUCHOS MEDIOS DE CULTIVO ES UNA INFUSION DE EXTRACTOS DE CARNE Y PEPTONA. EL AGAR ES UN ELEMENTO SOLIDIFICANTE MUY EMPLEADO PARA LA PREPARACION DE MEDIOS DE CULTIVO.

LOS MEDIOS DE CULTIVO PREPARADOS PUEDEN SER CLASIFICADOS POR SU ASPECTO EN: LIQUIDOS, SEMISOLIDOS, SOLIDOS. Y POR SU USO EN: MEDIOS DE CULTIVOS BASICOS, MEDIOS DE CULTIVOS ESPECIALES COMO: MEJORADOS, SELECTIVOS, DIFERENCIALES, DE TRANSPORTE

PRACTICA N° 5 "VACIADO DEL AGAR EN CAJAS PETRI Y PREPACION DE MEDIOS DE CULTIVOS LIQUIDOS”

OBJETIVO: EL ALUMNO APRENDERA LA TECNICA DEL VACIADO EN PLACA DEL MEDIO DE CULTIVO EN CAJAS PETRI Y PREPARARA MEDIOS DE CULTIVO LIQUIDO ESTERIL.

ESTOS PREPARADOS ESTERILES QUE POSEEN LOS ELEMENTOS NECESARIOS PARA EL DESARROLLO DE UN MICROOORGANISMO, SE DENOMINA MEDIO DE CULTIVO Y PUEDEN DIVIDIRSE POR SU: ASPECTO (MEDIOS LIQUIDOS, MEDIOS SEMISOLIDOS, MEDIOS SOLIDOS), USO (MEDIOS DE CULTIVO BASICOS, MEDIOS DE CULTIVOS ESPECIALES)

PRACTICA N° 6 “SEMBRADO EN PLACA DE MICROOORGANISMOS BACTERIANOS”

 OBJETIVO: OBSERVAR LA GRAN VARIEDAD DE MICROORGANISMOS PRESENTES EN EL MEDIO AMBIENTE, DETERMINANDO LAS DIFERENTES MORFOLOGIAS DE COLONIAS QUE SE OBTIENEN.

LOS EFECTOS DE UN DESINFECTANTE POR MEDIO DEL CRECIMIENTO DE COLONIAS DE BACTERIAS EN UN MEDIO DE CULTIVO EN CAJAS DE PETRI

UN ESTUDIO ADECUADO DE MICROORGANISMOS QUE HAY EN ESTOS HABITAT REQUIERE TECNICAS QUE PERMITAN CONOCER Y ORDENAR LA COMPLEJA POBLACION MIXTA O CULTIVO MIXTO. LOS MICROORGANISMOS SE CULTIVAN EN EL LABORATORIO SOBRE MATERIALES NUTRITIVOS DENOMINADOS MEDIOS. SE DISPONE DE UNA GRAN CANTIDAD DE MEDIOS Y LA CLASE QUE SE DEBE DE UTILIZAR DEPENDE DE MUCHOS FACTORES Y DE LOS CUALES ES LA CLASE DE LOS MICROORGANISMOS QUE SE VA A CULTIVAR. DURANTE LA INCUBACION DE 37°C LAS CELULAS MICROBIANAS INDIVIDUALES SE REPRODUCEN TAN RAPIDAMENTE QUE EN UN LAPSO DE 18 A 24 HORAS PRODUCEN MASAS VISIBLES DE CELULAS DENOMINADAS COLONIAS.

PRACTICA N° 7 “AISLAMIENTO DE BACTERIAS MEDIANTE EL METODO DE SIEMBRA EN PLACA POR ESTRIA”

OBJETIVO: DEMOSTACION DE LOS MEDIOS DE DEFENSA DEL HUESPED EN LA PIEL Y GARGANTA MEDIANTE EL METODO DE SIEMBRA EN PLACA POR ESTRIA.

LOS FACTORES MECANICOS, QUIMICOS Y MICROBIANOS DESEMPEÑAN UN PAPEL IMPORTANTE AL RESTRINGIR LA COLONIZACION DE LAS BACTERIAS A LAS SUPERFICIES CORPORALES

FACTORES MECANICOS

FACTORES QUIMICOS

FACTORES MICROBIANOS

DESCRIPCION DEL TIPO DE COLONIAS OBTENIDAS:

OBSERVAR LAS COLONIAS OBTENIDAS Y DESCRIBIRLAS TENIENDO EN CUENTA LAS SIGUIENTES CARACTERISTICAS:

FROMA

TAMAÑO

COLOR BORDE

ELEVACION

SUPERFICIE

PRACTICA N° 8 “PREPARACION DE UN FROTIS BACTERIANO”

SE DENOMINA FROTIS A LA EXTENSIONQUE SE REALIZA SOBRE UN PORTAOBJETO DE UNA MUESTRA O CULTIVO CON OBJETO DE SEPARAR LO MAS POSIBLE LOS MICROORGANISMOS YA QUE SI APARECEN AGRUPADOS EN LA PREPARACION ES UY DIFICIL DE OBTENER UNA IMAGENCLARA Y NITIDA.

ESTE FROTIS DEBE DE SER FIJADO POSTERIORMENTE A UN PORTAOBJETO PARA PODER APLICAR LOS METODOS HABITUALES DE TINCION QUE PERMITAN LA OBSERVACION AL MICROSCOPIO DE LAS BACTERIAS SIN QUE LA MUESTRA SEA ARRASTRADAS EN LOS SUCESIVOS LAVADOS.

LA FIJACION DE UNA EXTENSION BACTERIANA HACE QUE LAS BACTERIAS QUEDEN INACTIVAS Y ADHERIDAS AL VIDRIO.

PRACTICA N°9 “COLORACION DE GRAM”

OBJETIVO: EL ALUMNO APLICARA UNA TECNICA DE COLORACION DIFERENCIAL PARA LA IDENTIFICACION DE BACTERIAS GRAM POSITIVAS Y GRAM NEGATIVAS

TINCION EMPLEADA EN MIMCROBIOLOGIA PARA LA VISUALIZACION DE BACTERIAS EN MUESTRAS CLINICAS. TAMBIEN SE EMPLEA COMO PRIMER PASO EN LA DIFERENCIACION BACTERIANA.

EL EXAMEN CON MICROSCOPIO OPTICO DE PREPARACION CON TINCION DE GRAM SE EMPPLEA DE RUTINA PARA DETERMINAR LA FORMA DE LAS BACTERIAS.

EL VALOR DIAGNOSTICO DE ESTA TINCION ES VARIABLE; NORMALMENTE PERMITE UNA BUENA ORIENTACION AL MICROBIOLOGO PARA SELECCIONAR LAS TECNICAS DE CULTIVO MAS ADECUADAS.

PRACTICA N° 10 “TINCION ACIDO-ALCOHOL RESISTENTE”

OBJETIVO: EL ALUMNO APLICARA LAS TECNICAS DE COLORACION DE MICROORGANISMOS ACIDO-RESISTENTES PARA DIFERENCIARLOS E IDENTIFICARLOS EN BASE A SUS PROPIEDADES MORFOLOGICAS.

PRACTICA N°11 “TINCION DE LA CAPSULA BACTERIANA”

OBJETIVO: EL ALUMNO APRENDERA DIVERSAS TECNICAS PARA LA TINCION DE LA CAPSULA BACTERIANA EN DISTINTOS CULTIVOS BACTERIOLOGICOS.

LA CAPSULA BACTERIANA ES UNA CAPA DE MATERIAL VISCOSA O MOCOIDE.EL TAMAÑO DE ESTA CAPSULA ESTA NFLUENCIADO POR EL MEDIO EN EL QUE SE CRECE LA BACTERIA. LAS CAPSULAS BACTERIANAS SON IMPORTANTES TANTO COMO PARA LAS BACTERIAS COMO PARA LOS OTROS ORGANISMOS.. A LAS BACTERIAS LE PROPORCIONA UNA CUBIERTA PROTECTORA Y ADEMAS SIRVEN DE RESERVORIO DE ALIMENTO ALMACENADO

LAS CAPSULAS DE CIERTAS BACTERIAS PRODUCTORAS DE ENFERMEDADES AUMENTAN LA CAPACIDAD INFECTIVA DE LAS BACTERIAS. SI LAS BACTERIAS PIERDE TOTALMENTE SU CAPSULA PUEDE PERDER SU VIRULENCIA Y POR LO TANTO SU CAPACIDAD DE PRODUCIR ENFERMEDAD.

LAS CAPSULAS TIENEN DIVERSAS PROPIEDADES COMO INDUCE LA PRODUCCION DE ANTICUERPOS PROTECTORESY PERMITE LA DIFERENCIACION DE TIPOS SEROLOGICOS DENTRO DE LA MISMA ESPECIE YA SEA POR AGLUTINACION POR SUEROS.

         PRACTICA N°12 “TINCIONES SELECTIVAS”

OBJETIVO: EL ALUMNO APLICARA LA TECNICA DE TINCION

ESPECIFICA PARA LOGRAR OBSERVAR EN EL MICROSCOPIO LA PARED CELULAR Y ENDOSPORAS EN DISTINTAS MUESTRAS BACTERIOLOGICAS.

LAS PAREDES CELULARES BACTERIANAS SON ESENCIALES PARA EL CRECIMIENTO Y LA DIVISION.

TODAS LAS BACTERIAS POSEEN PAREDES CELULARES RIGIDAS QUE PROTEGEN A LA CELULA DE EXPLOTAR EN MEDIOS DE BAJA PRESION OSMOTICA.

LAS ESPORAS SON ELEMENTOS DE REPRODUCCION Y DE RESISTENCIA A UN MEDIO ADVERSO QUE PRESENTAN ALGUNAS BACTERIAS, ESPECIALMENTE DEL GENERO BACILAR. ESTOS CUERPOS SON PRODUCIDOS EN EL ULTIMO ESTADIO DEL CRECIMIENTO CELULAR QUE BAJO CONDICIONES APROPIADAS GERMINAN Y PRODUCEN LA CLASE ORIGINAL DE LAS CELULAS EN CRECIMIENTO VEGETATIVO

LAS ESPORAS SON RESISTENTES A MUCHOS AGENTES QUIMICOS Y FISICOS.EXISTEN DOS TIPOS DE ESPORAS: LAS ENDOSPORAS Y LAS EXOSPORAS.

PRACTICA N° 13 “ANTIBIOGRAMA”

OBJETIVO: EL ALUMNO APRENDERA A DESARROLLAR DE MANERA CORRECTA LA TECNICA DEL ANTIBIOGRAMA.

LA TECNICA DEL ANTIBIOGRAMA ES UTIL PARA EL ESTUDIO BACTERIOLOGICO PARA LA RESISTENCIA QUE PRESENTAN LAS BACTERIAS HACIA LOS ANTIBIOTICOS.

UN ANTIBIOGRAMA CONSISTE EN PONER EN CONTACTO AL GERMEN QUE HEMOS CULTIVADO CON DISTINTOS ANTIBIOTICOS PARA VER CUAL DE ELLOS ES EL QUE MEJOR VA COMO TRATAMIENTO.

SE CULTIVAN EN DISCOS LOS CUALES SON UNOS RECEPTACULOS CIRCULARESCON SUSTANCIAS QUE FAVORECEN EL CRECIEMIENTO DE LOS MICROORGANISMOS.

EL PRIMER OBJETIVO DEL ANTIBIOGRAMA ES EL DE MEDIR LA SENSIBILIDAD DE UNA CEPA BACTERIANA QUE SE SOSPECHA EN LA RESPONSABLE DE UNA INFECCION A UNO O VARIOS ANTIBIOTICOS.

EL SEGUNDO OBJETIVO DEL ANTIBIOGRAMA ES EL DE SEGUIR LA EVOLUCION DE LAS RESISTENCIAS BACTERIANAS.

PRACTICA N°14 “CULTIVO FARINGEO”

OBJETIVO: IDENTIFICA ALGUNAS ESPECIES QUE CONFORMAN LA FLORA PATOGENA QUE SE PUEDEN DESARROLLAR EN LA REGION FARINGEA.

LOS CULTIVOS DE GARGANTA SE OBTIENEN PRINCIPALMENTE PARA DETECTAR ESTREPTOCOCOS BETA-HEMOLITICOS DEL GRUPO A. CLINICAMENTE UNA FARINGITIS ESTREPTOCOCICA SI SE OBSERVA UNA MUCOSA DIFUSAMENTE. LA FLORA COMENSAL ESTA COMPUESTA POR UNA VARIEDAD DE BACTERIAS FACULTATIVAS Y CIERTAS LEVADURAS.

PRACTICA N° 15 “IDENTIFICACION DE STAPHYLOCOCCUS AUREUS.

OBJETIVO: APLICA LAS PRUEBAS BIOQUIMICAS DE LA COAGULASA Y CATALASA COMO MEDIOS PARA LA IDENTIFICACION DE S. AUREUS.

LA CATALASA ES UNA ENZIMA QUE DESCOMPONE EL PEROXIDO DE HIDROGENO EN OXIGENO Y AGUA. QUIMICAMENTE LA CATALASA ES UNA HEMOPROTEINA DE ESTRUCTURA SIMILAR A LA DE LA HEMOGLOBINA.

LA PRUEBA DE LA CATALASA LLEVADAA CABO EN PORTA OBJETOS O EN TUBOS ES MU COMUNMENTE UTILIZADA PARA DIFERENCIAR ESTREPTOCOCOS.

LA COAGULASA ES UNA ENZIMA PROTEICA DE COMPOSICION QUIMICA DESCONOCIDA CAPAZ DE TRANSFORMAR EL FIBRINOGENO EN FIBRINA. SE CREE QUE LA COAGULASA FUNCIONA EN VIVO PRODUCIENDO UNA BERRERA EN EL SITIOS DE LA INFECCION ESTAFILOCOCICA. LA COAGULASA SE HALLA EN 2 FORMAS “LIBRE” Y “FIJA”.

PRACTICA N° 16 “UROCULTIVO”

EL ALUMNO APRENDERA A TOMAR LA MUESTRA PARA UROCULTIVO, APRENDA A PROCESARLAS Y A IDENTIFICAR LOS MICROORGANISMOS CAUSALES DE INFECCIONES DE VIAS URINARIAS.

LAS INFECCIONES ABARCAN ENFERMEDADES QUE AFECTAN AREAS QUE VAN DESDE EL RIÑON HASTA LA URETRA. LOS SIGNOS Y SINTOMAS CUANDO HAY INFECCION DEL TRACTO URINARIO SON PIURIA, DISURIAA, HEMATURIA Y DOLOR.

LOS AGENTES BACTERIANOS GENERALMENTE ASOCIADOS CON INFECCIONES DEL TRACTO URINARIO SON: ESTERICHIA COLI, KLEBSIELLA, STREPTOCOCOS DEL GRUPO D Y PSEUDOMONAS AERUGINOSA.

PRACTICA N°17 “COPROCULTIVO”

OBJETIVO:QUE EL ALUMNO APRENDA A PROCESAR LAS MUESTRAS PARA REALIZAR UN COPROCULTIVO, IDENTIFIQUE LOS MICROORGANISMOS AISLADOS Y RECONOZCA AQUELLOS QUE TIENEN INTERES CLINICO.

SE CONOCEN VARIAS INFECCIONES BACTERIANAS ENE L CONDUCTO INTESTINAL.

LOS MICROORGANISMOS QUE AFECTAN EL TRACTO GASTROINTESTINAL ESTAN PRODUCIENDO  LA INFECCION,ESTA SE MANIFESTA POR UN SIGNO Y ES LA DIARREA.

EN LAS INFECCIONES DEL TRACTO INTESTINAL EL MATERIAL CLINICO QUE COMUNMENTE SE ESTUDIA ES LA MATERIA FECAL. ES ESTUDIO DE LA MATERIA FECAL PARA LA BUSQUEDA DE PATOGENOS BACTERIANOS QUE AFECTAN EL TRACTO INTESTINAL SE DENOMINA COPROCULTIVO. EL COPROCULTIVO ES UN DIAGNOSTICO DE RUTINA  EL CUAL ESTA CONSTITUIDO POR VARIAS ETAPAS.

ANALISIS MACROSCOPICO

ANALISIS MICROSCOPICO

CULTIVO

PRACTICA N°18 “EXUDADO VAGINAL”

OBJETIVO: QUE EL ALUMNO APRENDA LA METODOLOGIA PARA LA TOMA Y PROCESAMIENTOS DE UN EXUDADO VAGINAL E IDENTIFICAR LAS BACTERIAS DE INTERES CLINICO.

EL EXUDADO VAGINAL ES UN MATERIAL CLINICO EMPLEADO PARA EL DIAGNOSTICO DE INFECCIONES DEL TRACTO GENITAL FEMENINO,

LOS SIGNOS Y SINTOMAS QUE CARACTERIZAN LA INFECCION DEL TRACTO GENITAL FEMENINO SON: SECRECION VAGINAL PUROLENTA, ARDOR AL ORINAR, DOLOR Y ESPASMO.

EN EL DIAGNOSTICO DE LAS INFECCIONES DEL TRACTO GENITAL FEMENINO SE TOMA EL Ph DEL ESTUDIO VAGINAL, ESTUDIO EN FRESCO, FROTE TEÑIDO EN GRAM, CULTIVO Y UNA IDENTIFICACION.